五種酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒檢測(cè)方法優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比解釋
日期：2021-12-06 | 中海生物技術(shù)文庫(kù) | 瀏覽：1863 次
中海生物技術(shù)為大家解釋五種ELISA試劑zhzbio.com盒酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)方法優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比參照：
| 序號(hào) | ELISA試劑盒檢測(cè)方法 | 優(yōu)點(diǎn) | 缺點(diǎn) | 解釋 |
| (一) | 直接法(direct Elisa) | 操作程序短，所以不需要使用二抗，避免了交互反應(yīng)。 | 實(shí)驗(yàn)中所有的一級(jí)抗體都要用酶標(biāo)記，但并不是每種抗體都適合標(biāo)記，成本相對(duì)較高。 | 抗原總量可通過(guò)直接將抗原固定在固體載體上并加入酶標(biāo)一抗來(lái)測(cè)定。這種一級(jí)抗體的特異性非常重要。 |
| (二) | 間接法(indirect Elisa) | 二抗可以加強(qiáng)信號(hào)，不同的測(cè)定分析有很多選擇。沒(méi)有酶標(biāo)記的一級(jí)抗體可以保持其免疫反應(yīng)性。 | 互動(dòng)反應(yīng)產(chǎn)生概率高。 | 這類(lèi)方法與直接法相似，但不同的是一級(jí)抗體沒(méi)有用酶標(biāo)記，用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體鑒定一級(jí)抗體來(lái)確定抗原的量。 |
| (三) | 雙抗體夾心法(sandwich Elisa) | 靈敏度和特異性高，抗原不用提前純化。 | 抗原務(wù)必有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合位點(diǎn)。 | 進(jìn)行檢測(cè)到的抗原包被在兩種抗體之間，在其中一種抗體將抗原穩(wěn)固在固體載體上，即捕獲抗體。另一種是進(jìn)行檢測(cè)抗體，可以用酶標(biāo)記后直接測(cè)定抗原量?；蚴菦](méi)有標(biāo)記。隨后用酶標(biāo)二抗測(cè)定抗原量。務(wù)必仔細(xì)選擇這兩種抗體，以防止相互間反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)相同的抗原結(jié)合位點(diǎn)。 |
| (四) | 競(jìng)爭(zhēng)法(competitive Elisa) | 適用于不純樣品，數(shù)據(jù)重現(xiàn)性好。 | 整體敏感性和特異性差。 | 樣品中的無(wú)抗原抗原與純化并穩(wěn)固在固體載體上的抗原固定化抗原競(jìng)爭(zhēng)相同的抗體。當(dāng)樣品中游離抗原較多時(shí)，可以結(jié)合較多的抗體，而固定化抗原只能夠結(jié)合較少的抗體，相反也是。清洗步驟后，洗去游離抗原和抗體的復(fù)合物，只留下穩(wěn)固抗原和抗體的復(fù)合物，與對(duì)照組僅穩(wěn)固抗原的結(jié)果做好比較，依據(jù)色差可以計(jì)算出樣品中的抗原含量。 |
| (五) | 基于細(xì)胞法(cell-based Elisa) | 不用裂解細(xì)胞，于是靶蛋白損失較少，可以測(cè)量完整細(xì)胞/貼壁細(xì)胞/非貼壁細(xì)胞。 | 抗原量無(wú)法確定。 | 是一種新的定性蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)，在其中細(xì)胞直接在微孔板中培養(yǎng)。進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，不用提取蛋白質(zhì)或裂解細(xì)胞，直接測(cè)量刺激或抑制后微孔板中蛋白質(zhì)的變化。 |
本文鏈接：http://b-c-home.com/news/wenku-elisajiancefa.html
